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发布时间:2023-11-08 02:04:18

[判断题]限制性内切核酸酶 PstI切割质粒 pBR322后,再用外切核酸酶 ExoⅢ进行系列缺失,可得到一系列大小不同的缺失突变体。

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[简答题]核酸酶与外切核酸酶Ⅲ用于系列缺失突变有什么不同?
[单项选择]λ外切核酸酶:()。
A. 作用时不需要模板
B. 可以从3’末端降解DNA
C. 可以从 nick 部位降解 DNA
D. 可以从gap 部位降解 DNA
[单项选择]下列DNA不是λ外切核酸酶作用底物的是()。
A. 具有3’突出端的双链 DNA
B. 具有5’突出端的双链 DNA
C. 切口DNA
D. 平末端 DNA
[判断题]λ外切核酸酶的作用产物可以作为末端转移酶的作用底物。
[简答题]λ外切核酸酶(1ambda exonuclease)基本活性是什么?在基因工程中有什么应用?
[填空题]λ外切核酸酶可从双链 DNA 的 5’端依次切下 5’单核苷酸,但对不同末端的底物来说,作用效率不同,()最高,()最低。
[判断题]λ外切核酸酶不能在双链 DNA 的 gap 和nick 处切割 DNA。
[简答题]有人用限制性内切核酸酶 EcoRl 分别切割松弛型质粒 ColEl 和严紧型质粒 pSCl01(各有一个切点),然后重组连接形成一个杂种质粒 pSCl34,请推测这种质粒有什么特性和用途。
[简答题]用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末端,该酶在 lac 基因内有切割位点,并在第二个氨基酸密码子内,该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后,用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端,然后重新连接成环,转化 Lac-Tets受体菌,筛选 Tet 转化子,问:Lacr的基因型是什么?并说明原因。
[简答题]说明变性定位法和限制性内切核酸酶定位法研究质粒复制起点的原理。
[简答题]何谓限制性内切核酸酶的切割频率?
[填空题]Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别()个碱基,也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析,限制性内切核酸酶识别序列具有()倾向,即它们在识别序列中含量较高。  8.EcoK是 I类限制性内切核酸酶,分子组成是α2 β2 γ,分子量 300kDa。在这些亚基中,o 亚基具有()作用;β亚基具有() 的活性;γ亚基的作用则是()。
[判断题]同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA,得到的片段的两个末端都是相同的。
[判断题]用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA,得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
[填空题]由于 DNA是由 4 种碱基组成的,所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是()。
[判断题]用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后,要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活,这样有利于重组连接。
[填空题]如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5,突出的黏性末端,则可以用();进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端,可以用()进行 3’末端标记。
[简答题]用限制性内切核酸酶切割 DNA 后,经电泳检查,发现有拖尾现象,其可能的原因是什么?
[判断题]如果限制性内切核酸酶的识别位点位于 DNA分子的末端,那么接近末端的程度也影响切割,如 HpaⅡ和 MboI要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。

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