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[填空题]由于 DNA是由 4 种碱基组成的，所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是（）。
[填空题]Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别（）个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，限制性内切核酸酶识别序列具有（）倾向，即它们在识别序列中含量较高。 8．EcoK是 I类限制性内切核酸酶，分子组成是α2 β2 γ，分子量 300kDa。在这些亚基中，o 亚基具有（）作用；β亚基具有（） 的活性；γ亚基的作用则是（）。
[判断题]用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
[填空题]第一个分离的限制性内切核酸酶是（）；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是（）。
[判断题]同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。
[判断题]用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后，要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活，这样有利于重组连接。
[判断题]限制性内切核酸酶 PstI切割质粒 pBR322后，再用外切核酸酶 ExoⅢ进行系列缺失，可得到一系列大小不同的缺失突变体。
[简答题]用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体，已知该酶识别的是4个碱基序列，并产生有两个碱基突出的单链末端，该酶在 lac 基因内有切割位点，并在第二个氨基酸密码子内，该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后，用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端，然后重新连接成环，转化 Lac-Tets受体菌，筛选 Tet 转化子，问：Lacr的基因型是什么？并说明原因。
[填空题]如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5，突出的黏性末端，则可以用（）；进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端，可以用（）进行 3’末端标记。
[简答题]用限制性内切核酸酶切割 DNA 后，经电泳检查，发现有拖尾现象，其可能的原因是什么？
[判断题]基因工程中使用的Ⅱ类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。
[单项选择]Ⅱ型限制性内切核酸酶：（）。
A. 有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列
B. 仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
C. 限制性识别非甲基化的核苷酸序列
D. 有外切核酸酶和甲基化酶活性
E. 仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
[单项选择]限制性内切核酸酶可以特异性地识别：（）。
A. 双链DNA的特定碱基对
B. 双链 DNA 的特定碱基序列
C. 特定的三联密码
D. 以上都正确
[判断题]限制性内切核酸酶在 DNA中的识别／切割位点的二级／三级结构也影响酶切效率。一般来说，完全切割质粒或病毒 DNA，要比切割线状 DNA需要更多的酶，最高的需要 20倍。
[简答题]有人用限制性内切核酸酶 EcoRl 分别切割松弛型质粒 ColEl 和严紧型质粒 pSCl01（各有一个切点），然后重组连接形成一个杂种质粒 pSCl34，请推测这种质粒有什么特性和用途。
[单项选择]下列选项中，符合Ⅱ类限制性内切核酸酶特点的是
A. 识别的序列呈回文结构
B. 没有特异酶解位点
C. 同时有连接酶活性
D. 可切割细菌体内自身DNA
[单项选择]限制性内切核酸酶的星号活性是指：（）。
A. 在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性
B. 活性大大提高
C. 切割速度大大加快
D. 识别序列与原来的完全不同
[判断题]如果限制性内切核酸酶的识别位点位于 DNA分子的末端，那么接近末端的程度也影响切割，如 HpaⅡ和 MboI要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。
